在本季中，Tim Speedle离开了，而新人Ryan Wolfe则加入了小组。
Horatio Caine：David Caruso饰演，是迈阿密达德郡犯罪实验室的组长，曾经是拆弹小组的警官，现在是监识分析师。
Calleigh Duquesne：Emily Procter演，弹道科学家，出生于路易西安那州达尼尔（Darnell），西班牙语十分流利，曾在图兰大学（Tulane University）获得物理学学士学位。
Eric Delko：Adam Rodriguez饰演，指纹与药品辨识专家，土生土长于迈阿密，曾在迈阿密大学获得化学学士学位。父亲俄罗斯人，母亲古巴人，所以西班牙语和俄语都很流利。当情况需要时，达可在小组里通常是扮演蛙人的角色。
Alexx Woods：Khandi Alexander饰演，迈阿密达德郡的验尸官。她有一个古怪的习惯就是在验尸的时候跟尸体讲话，通常是想要让死者死后可以更为安详。
Ryan Wolfe：Jonathan Togo饰演，是一个想进入真实鑑识工作的基层巡逻员警。他了解到自己永远无法取代史毕的地位，只能尽力地成为小组的一员。沃夫首次出现在“Under the Influence”这一集，不过直到“Hell Night”这一集之后才变成常态演出。
Yelena Salas：Sofia Milos饰演，一个常常跟CSI一起调查的重案组探员，也是何瑞修弟弟雷蒙的遗孀。
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2.0
安娜·玛利亚·欧罗兹寇 豪尔赫·恩里克·阿维利奥 Juanita Molina Zharick León Mario Duarte Julián Arango Ricardo Vélez Sebastian Osorio Lorna Paz 娜塔莉亚·拉米雷斯 Stefanía Gómez Rodrigo Candamill Luces Velásquez Júlio César Herrera Marcela Posada Alberto León Jaramillo